本试剂盒可适用于各种类型的血液样本,无需繁琐的核酸提取纯化,仅须血液样本简单裂解取上清即可进行qPCR扩增,操作简便,可降低污染风险,且检测结果与核酸提取后的纯DNA产物作为模板的结果一致。
试剂盒中特有核酸释放剂可将血液的核酸快速释放,配合专门针对血液样本优化的qPCR缓冲体系,以及性能优异的热启动基因工程改造Taq pro DNA polymerase,可耐受血液样本中的PCR抑制物,可针对不同GC%含量模板实现高特异、高灵敏扩增反应、兼容不同Tm值的引物/探针,适用于新鲜血、4°/-20°储存/冻存血、常规抗凝剂血的Taqman 探针法SNP检测,qPCR探针法定量检测等场景。
StarLighter 血液简单裂解直扩探针法qPCR试剂盒
FS-Q9002-S,FS-Q9002-01,FS-Q9003-S,FS-Q9003-01
产品优势
2、裂解释放效率高:释放剂裂解效果与血液提取核酸基因组效果一致;
3、样本兼容性广泛:适用于新鲜血、4°储存血、-20°冻存血、EDTA抗凝血等样本;
4、引物/探针兼容性广泛:对不同GC%/Tm值的引物/探针均可实现理想扩增;
产品应用
1、Taqman 探针法SNP检测;
2、qPCR探针法定量检测。
产品性能
1.操作简单,快速。
从血液到基因分型/定量分析仅需1h左右即可完成。
Fig.1 试剂盒操作流程图
将已知SNP基因分型(杂合型A位点:FAM+/Vic-,杂合型B位点:FAM+/Vic-,杂合型C位点:FAM+/Vic-)的新鲜血液样本A用本试剂盒进行基因分型检测,检测结果准确(Fig.2)。
Fig.2 新鲜血样本A裂解释放后对不同SNP位点的检测结果。血液裂解离心取上清,20 μL反应体系,加4 μL 上清做为模板进行qPCR,检测结果与Sanger测序结果一致。
将已知SNP基因分型(杂合型A位点:FAM+/Vic-,杂合型B位点:FAM+/Vic-,杂合型C位点:FAM+/Vic-)的冷藏血液样本A(4°储存2个月)用本试剂盒进行基因分型检测,检测结果准确(Fig.3)。
Fig.3 储存血样本A裂解释放后对不同SNP位点的检测结果。血液裂解离心取上清,20 μL反应体系,加4 μL 上清做为模板进行qPCR,检测结果与Sanger测序结果一致。
3.核酸释放检测结果荧光信号强度及Ct值媲美经核酸提取获得高纯DNA的扩增结果各取A样本200 μL EDTA血液,分别用本试剂盒中的核酸释放剂以及全血基因组DNA提取试剂盒(FS-B8001)进行处理,在得到相同上清/洗脱体积情况下,各取4 μL上清为模板,分别对B位点进行检测。结果显示并本试剂盒对全血简单处理后的扩增结果与全血核酸提取纯化检测的结果Ct值一致,荧光强度不变(Fig.4)。

Fig.4 启衡星血液直扩试剂盒与血液核酸提取试剂盒对比。粗线为核酸释放液处理的qPCR结果,细线为全血基因组DNA提取纯化后的qPCR结果。蓝色为FAM通道,橘色为Rox通道(内参),绿色为Vic通道。