• StarLighter 热启动 Taq Pro DNA 聚合酶(无甘油)
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StarLighter 热启动 Taq Pro DNA 聚合酶(无甘油)

No.FS-P9001-S/ FS-P9001-01/FS-P9001-02

StarLighter 热启动 Taq Pro DNA 聚合酶经过性能优化,即能快速、高效合成大量 DNA 又能有效耐受各种抑制剂,可直接用于快速扩增、多重扩增及其他粗提样本的扩增。使用该酶可在室温配制反应体系,因为该酶使用抗体封闭,90℃ 以上 30 sec 才可恢复酶活性,所以在室温下没有活性,从而能有效避免形成引物二聚体和非特异性延伸,增加 DNA 扩增的特异性。该酶有 5’→3’ 外切酶活性,无 3’→5’ 校正外切酶活性。

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产品描述

产品简介

StarLighter 热启动 Taq Pro DNA 聚合酶经过性能优化,即能快速、高效合成大量 DNA 又能有效耐受各种抑制剂,可直接用于快速扩增、多重扩增及其他粗提样本的扩增。使用该酶可在室温配制反应体系,因为该酶使用抗体封闭,90℃ 以上 30 sec 才可恢复酶活性,所以在室温下没有活性,从而能有效避免形成引物二聚体和非特异性延伸,增加 DNA 扩增的特异性。该酶有 5’→3’ 外切酶活性,无 3’→5’ 校正外切酶活性。

本产品在扩增产物具有 3’-dA 突出末端,纯化后可直接用 TA 载体克隆。扩增速度 1 ~ 10 s/kb。

本产品为无甘油产品,可应用于冻干试剂的开发。

产品组分


储存及运输条件

-25 ~ -15℃ 保存,< 0℃ 运输。

产品应用

菌液直扩;

粗提样本扩增;

其他 PCR 快速扩增等。

产品特点

显著耐受各种抑制因子;

有效扩增 GC 含量高、二级结构复杂的模板;

省时高效:可用于菌液、菌落以及粗提取样本的直扩。

实验流程

  1. 体系配制(20 μL 反应体系为例)
    • 使用试剂前确保彻底融化并混匀,加入反应体系的所有模板、引物等组分也应充分混匀;
    • 计算所加各组分的体积(参考下面表格),并小心吸取准确体积到 PCR 反应管内;

组分

使用量

5 × Buffer (根据自己实验需求配制)

4 μL

Forward Primer (10 μM)

0.5 μL

Reverse Primer (10 μM) 

0.5 μL

StarLighter HotStart Taq Pro DNA Polymerase (Glycerine Free)

0.2 ~ 1 μL

dNTP (2.5 mM Each) 需自备

1.6 μL

Template

1 μL

ddH2O

Up to 20 μL

总体积

20 μL

  1. 引物反应终浓度可以在1 ~ 1 μM 之间调整。
  2. 模板为基因组 DNA 推荐加入量 10 ~ 100 ng,模板为质粒或者PCR产物DNA推荐加入量 < 10 ng。
    • 盖好管盖,瞬时离心。
  3. PCR反应程序推荐:

步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

2 min

1 Cycle

变性

95℃

10 ~ 20 sec

20 ~ 35 Cycles

退火

55 ~ 65℃

20 ~ 30 sec

延伸

72℃

30 ~ 60 sec 

最后延伸

72℃

3 min

1 Cycle

  1. 预变性时间设置在 30 sec ~ 5 min,若模板 GC 含量较高可适当延长预变性时间至 5 min。
  2. 根据引物 Tm 调整退火温度(推荐温度 55 ~ 65℃)。
  3. 延伸时间根据 PCR 产物的长度确定。
  4. 退火、延伸循环数可以根据模板的起始量以及需要的产物量进行调整。以 4 ng 人基因组DNA(或 5 mm 血卡)为模板,延伸 45 sec,扩增 30 个循环能实现约 1 μg 的产物积累。

 

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