StarPure Blood Total RNA Extraction Kit for PAXgene Blood RNA Tube 专为从 PAXgene 采血管保存的血液样本中分离总 RNA 而设计。提取过程可完全去除污染物和酶抑制剂，得到高质量的 RNA。使用本试剂盒纯化的 RNA 可用于 RT-PCR 等实验。
通过离心从保存在 PAXgene 采血管中的血液样本中收集细胞，在含有蛋白酶 K 的优化缓冲液中洗涤和裂解样品后，通过离心去除细胞碎片和其他颗粒。用乙醇调节结合条件后，将上清转移到 RNA 结合柱中，使 RNA 与柱膜结合，通过短暂离心或真空步骤，去除液体。用柱上 DNase I消化法消化掉 gDNA。再经过三个洗涤步骤后，用无 RNase 的水洗脱纯化的 RNA。
产品优势
产品应用 使用本试剂盒纯化的 RNA 可用于 RT-PCR 等实验。 产品组分  实验步骤 1、装有样本的 PAXgene® Blood RNA Tube用离心机3,000-5,000 ×g 离心10 min，去上清。 2、加4 mL RNase-free 水，涡旋彻底重悬沉淀。 3、3,000-5,000 ×g 离心10 min，去上清。 ✮注：上清尽量去干净，否则会降低裂解效率，稀释裂解物，从而降低 RNA 产量。 4、向沉淀中加350 µL Resuspension Buffer，涡旋彻底重悬沉淀。 5、转移到一个新的离心管中，加300 µL Binding Buffer and 20 µL Proteinase K，涡旋5秒混匀。 6、放55℃加热震荡器上孵育10 min。 7、可选步骤：用装有20号针头（直径0.9 mm）的注射器抽吸裂解物至少五次，或者用电动匀浆器处理裂解物，可以剪切基因组 DNA，降低裂解物粘度，提高产量。 8、13,000 rpm 离心3 min，转移上清到新的离心管。 9、加入0.5×体积无水乙醇，涡旋混匀。 10、转移700 µL 混合物到 RNA 结合柱（配2 mL收集管），13,000 rpm，离心1 min。 11、弃掉收集管中液体，将吸附柱放回收集管。 12、重复10-11步，直到全部样本转移到 RNA 吸附柱。 13、加350 µL Protein Wash Buffer，13,000 rpm 离心1 min。 14、弃掉收集管中液体，将吸附柱放回收集管。 15、柱上去 gDNA，按如下方式制备 DNase I 消化反应混合物： ✮注：
✮注：确保用移液管将 DNase I 消化混合物直接移到膜上。如果一些混合物保留在 RNA结合柱的壁或 O 型圈上，DNase I 消化将不完全。 17、室温放置15 min。 18、加350 µL Protein Wash Buffer，13,000 rpm 离心1 min。 19、弃掉收集管中液体，将吸附柱放回收集管。 20、加500 µL Wash Buffer，13,000 rpm 离心1 min。 21、弃掉收集管中液体，将吸附柱放回收集管。 22、重复步骤20-21。 23、13,000 rpm 再次离心2 min，去掉柱上残余液体。 ✮注：残余的酒精会影响下游实验。 24、将吸附柱转移到一个新的1.5 mL 离心管中。 25、加入50-70 μL RNase-free water（提前70-90°C预热）到膜上，室温放置1 min。 26、13,000 rpm 离心2 min，收集并妥善保存洗脱下来的 RNA 样本。 相关产品链接核酸提取与纯化产品 |
