StarPure全血极速总RNA提取试剂盒

• 独有的裂解液配方，可直接裂解全血，不需要先裂解去除红细胞；
• 在合适的条件下储存18个月不影响使用效果；
• 离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好；
• 能有效的去除了5 S 在总 RNA 中含量，提高了纯度。

本产品适用于血液、血浆、血清和脑脊液等样品中 RNA 的提取，提取的 RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如 RT-PCR、RT-qPCR、体外转录、分子克隆等。

1. 取25 mL血液（或血清，血浆，脑脊液等等)加入0.75 mL Blood Lysis Buffer(体积比总是1:3)，然后吹吸几次帮助裂解。
2. 将样品剧烈震荡混匀后，在室温静置5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 加2 mL氯仿，剧烈振荡15秒并室温静置2分钟。
4. 于4℃13,000 rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无色的水相，RNA 存在于水相中。水相层的容量大约为所加 Blood Lysis Buffer 体积的60%，把水相转移到新管中，进行下一步操作。
5. 加入5 倍体积无水乙醇，颠倒混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱 RA 中（吸附柱套在收集管内）。
6. 室温（以下步骤均为室温）13,000rpm 离心30秒，弃掉废液，将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μL Protein Wash Buffer（请先检查是否已加入无水乙醇!），13,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
8. 加入500μL Blood Wash Buffer（请先检查是否已加入无水乙醇!），13,000 rpm 离心15秒，弃掉废液。
9. 重复一遍步骤8。
10. 将吸附柱RA 放回空收集管中，13,000 rpm 离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱RA，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50 μL RNase free water（提前65-70℃预热），室温放置2分钟，13,000 rpm 离心1分钟。如果需要较多 RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟。

✮注：如果需要 RNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积最好不少于30 μL，体积过小降低 RNA 洗脱效率，减少 RNA 产量。

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