• StarPure 植物快速总RNA提取试剂盒
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StarPure 植物快速总RNA提取试剂盒

No.FS-B2102-01

StarPure Plant Fast Total RNA Extraction Kit 适用于从植物组织中快速提取总 RNA,操作简单,一般25 min即可完成RNA的提取。独特的裂解液能迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA 酶,植物 RNA 助提剂 Plant Helper 帮助结合多糖多酚并通过离心去除,RNA 选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过漂洗去杂质。

货号/规格/价格:
FS-B2102-01/50 rxns/¥1078
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产品描述

StarPure Plant Fast Total RNA Extraction Kit
StarPure 植物快速总 RNA 提取试剂盒



产品优势

  • 提取过程不使用有毒的苯酚,氯仿,β-巯基乙醇或DTT等有毒试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
  • 在室温储存18个月不影响使用效果。但不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
  • 提取过程简单,时间短,且提取的RNA 完整性和纯度有保证;
  • 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值高达1~2.2,基本无 DNA 残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。

产品应用


适用于从植物组织中快速提取总 RNA

产品组分



实验步骤

  1. 直接研磨法(推荐):
     a.新鲜植物组织称重后取100mg-200 mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100 mg-200 mg放入研钵),加入10体积(1 mL)Plant Lysis Buffer和1体积(100 μL)Plant Helper室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液 Plant Lysis Buffer 立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
     ✮注:Plant Helper 是提取多糖多酚次级代谢产物色素含量丰富的困难样品不可缺少成分。
     b.将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15秒,13,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的 Plant Helper。

     c.取480μL裂解物上清(在不超过 RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
     d.立刻接操作步骤的步骤3。

  1. 液氮研磨法(提取复杂。易降解样品时推荐此法)
     a.取500 μL裂解液 Plant Lysis Buffer,转入1.5 mL离心管中,加入50 μL Plant Helper混匀备用。
     b.液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50 mg-100 mg细粉转入上述装有 Plant Lysis Buffer 和 Plant Helper的离心管,立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
    c.用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切 DNA,降低粘稠度和提高产量。
    d.将裂解物13,000 rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的 Plant Helper。

    e.取裂解物上清(在不超过RNA吸附柱能力的情况下可以取更多的上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
    f.立刻接操作步骤的步骤3。
✮注:以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理,可以提高产量。也就是使用1 mL的裂解液 Plant Lysis Buffer和100 μL Plant Helper和100 mg-200 mg的样品。
  1. 将混合物(每次小于720μL,多可以分两次加入)加入一个吸附柱 RA 中,(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm离心2分钟,弃掉废液。
确保离心后液体全部滤过去,膜上没有残留,如有必要,可以加大离心力和离心时间。
  1. 加700μL Protein Wash Buffer,室温放置1分钟,13,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。
  2. 加入500μL Wash Buffer(请先检查是否已加入无水乙醇!),13,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500 μL Wash Buffer,重复一遍。
  3. 将吸附柱RA 放回空收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
  4. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期 RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50 μL RNase free water(提前在70-90℃水浴中加热可提高产量),室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。

如果预期 RNA 产量>30 μg,加30-50 μL RNase free water重复步骤7,合并两次洗液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要 RNA 浓度高)。

洗脱两遍的 RNA 洗脱液 RNA 浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。

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