适用于多重扩增,兼容不同GC%含量的模板,扩增均一性好,血液input量范围宽。
使用启衡星血液直扩试剂盒及供应商T试剂盒分别对5%、10%、15%、20%、25%、30%不同比例新鲜EDTA抗凝血进行6重引物的直接扩增,扩增片段范围200-800bp,GC%范围35%-77%,扩增35个循环,取PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示, 5%~30%不同比例新鲜EDTA抗凝血投入量,对于6对引物的多重扩增,启衡星血液直扩试剂盒均能成功扩增,产物量高,扩增均一性好;而供应商T试剂盒未能扩出所有六条目的带,且产物量低,均一性差。启衡星血液直扩试剂盒具有更强的抗抑制剂耐受性,扩增性能优于供应商T产品。
兼容不同EDTA血液样本:新鲜血、4℃、室温以及-20℃冻存血液样本
取新鲜的EDTA抗凝血,室温分别放置5 min、1 d、2d 和 5d,用启衡星血液直扩试剂盒分别对这些血液样本对进行直接PCR 6重扩增。血液投入量为反应体积的10%, 扩增35个循环后,4000 rpm离心2~3min取上清产物进行凝胶电泳,由下图结果可知,在室温放置不同时间条件下,本试剂盒能准确扩出所有六条目的产物。
取新鲜的EDTA抗凝血,4℃放置1 d、2 d、5 d,用启衡星血液直扩试剂盒对这些血液样本进行直接PCR 6重扩增。血液投入量为反应体积的10%, 扩增35个循环后,4000 rpm离心2~3min取上清产物进行凝胶电泳,由下图3结果可知,在4℃不同放置时间条件下,本试剂盒均能准确扩出所有六条目的产物。
取新鲜的EDTA抗凝血,-20℃分别放置1 d、2 d 5 d、55 d、8个月、以及20个月用启衡星血液直扩试剂盒对这些血液样本进行直接PCR 6重扩增。血液投入量为反应体积的10%, 扩增35个循环后,4000 rpm离心2~3min取上清产物进行凝胶电泳,由下图结果可知,在-20℃不同放置时间条件下,本试剂盒均能准确扩出所有六条目的产物。