StarLighter 逆转录超强预混液(含gDNA去除)基于新一代逆转录酶(第四代基因工程改造酶)而开发,Mix中包含了逆转录所需的逆转录酶、随机引物、Oligo dT等反应组分,可在体系中直接加入RNA模板即可进行逆转录反应。同时还配备了高效去除gDNA的gDNA Removal和Buffer,可以在反转录的同时有效去除gDNA污染。新一代的逆转录酶耐受高温,可在42°C-65°C温度下表现出良好的逆转录活性,能有效逆转录复杂结构的RNA。
1.逆转录效率高,准确反映模板信息
2.耐高温、有效逆转录结构复杂的RNA
3.一步去除gDNA污染,不影响反转录性能
4.兼容高GC/AT模板以及降解样本,操作简单
1.高效去除gDNA
1.1 对含10% gDNA 污染的不同起始量(0.1ng,1ng,10ng,1000ng)的小鼠Total RNA 进行gDNA处理和反转录,随后进行qPCR定量,评估StarLigher 逆转录超强预混液(含gDNA去除)对gDNA的去除能力以及在gDNA污染下对RNA的反转录性能结果如下图:
1.2 对含有不同量gDNA 污染的100ng 小鼠Total RNA 进行gDNA去除和反转录,随后进行qPCR定量,评估StarLigher 逆转录超强预混液(含gDNA去除)对gDNA的去除能力以及在gDNA污染下对RNA的反转录性能结果如下图:
2.逆转录定量结果准确反应模板量信息
RNA input 和 qPCR 定量 output 表现出优秀的线性关系。不同反转录试剂对不同起始量(0.1ng,1ng,10ng,1000ng)的小鼠Total RNA 进行反转录,随后进行qPCR定量,比较不同反转录试剂对RNA投入量与qPCR Ct 值间的线性关系,结果如下图: