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新品上市|StarLighter PDX模型小鼠细胞浸润状态检测试剂盒

启衡星 StarLighter PDX 模型小鼠细胞浸润状态检测试剂盒是用于 PDX 模型质量控制的有效工具。PDX 模型是将病人肿瘤组织移植到免疫缺陷鼠建立的,能较好模拟肿瘤真实情况,但传代次数增加会导致肿瘤组织保真度下降,需严格验证和质量控制。该试剂盒采用双色荧光探针、双标准曲线绝对定量 qPCR 方法,检测 PDX 模型总 DNA 中小鼠 DNA 比例以推导浸润比例。产品具自主知识产权,优势包括结果准确可靠、定量范围宽等;兼容性方面,不同核酸提取方式和 qPCR 仪有相应要求。实验数据表明,其对不同比例的鼠、人质粒 DNA 及基因组 DNA 样本都能准确定量,定量结果准确。
Nov 28th,2024 518 浏览量
产品简介

人源肿瘤异种移植模型 (Patient-Derived tumor Xenograft , PDX)是将病人的肿瘤组织直接移植到免疫缺陷鼠而建立的人源异种移植模型,PDX模型能够保留原代肿瘤的遗传多样性和微环境,更好地模拟患者体内肿瘤的真实情况,是癌症机制研究和药物测试的有用工具。

但随着传代次数增加,肿瘤组织保真度下降。为了确保模型在传递过程以及之后的时间内保持一致,严格的验证和质量控制很重要。

启衡星StarLighter PDX模型小鼠细胞浸润状态检测试剂盒采用双色荧光探针、双标准曲线绝对定量qPCR方法检测PDX模型总DNA中小鼠DNA的比例,并以此推导小鼠细胞浸润比例,是PDX模型质量控制的有效工具。

01、产品优势
  • 具有自主知识产权的专用于人源、鼠源核酸检测定量试剂盒;

  • 双标准曲线绝对定量qPCR法,结果准确可靠;

  • 定量范围宽,适用于待测核酸浓度>1ng/μL的人鼠不同比例的混合核酸;

  • 标准曲线最低值为103copy/μL,可对人源核酸比例低至0.5%的混合核酸进行准确定量。

02、产品的兼容性 

  • 采用不同核酸提取方式提取的PDX模型核酸,其扩增效率可能有所不同,但对人源、鼠源核酸比例确认没有影响;

  • 使用不同品牌qPCR仪时,需按照仪器对参考染料Rox的要求,选择合适的Rox。

03、实验数据 

一、将分别含108,107,106,105,104,103拷贝的鼠和人两种基因靶标的两种质粒DNA做为标准品进行荧光定量,绘制标准曲线。


Fig.1 以103-108拷贝的鼠、人质粒绘制的标准曲线和扩增曲线图

二、对不同比例的鼠、人质粒DNA混合模拟样本进行测试(混合比例分别为:1:99、10:90、25:75、50:50),分别用105、104、103的拷贝数做为样本投入量进行qPCR定量,根据标准曲线计算混合样本中鼠和人基因的比例。

Fig.2  不同鼠、人质粒DNA混合模拟样本测试结果

三、对不同比例的鼠、人基因组DNA混合模拟样本进行测试(混合比例分别为:1:99、10:90、25:75、50:50),分别用10ng、25ng以及100ng做为样本投入量进行qPCR定量,根据标准曲线计算混合样本中鼠和人基因的比例。

结论:

StarLighter PDX模型小鼠细胞浸润状态检测试剂盒定量结果准确,对不同比例的鼠、人质粒DNA样本及不同比例的鼠、人基因组DNA样本都可以准确计算出鼠、人的DNA比例。

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