SYBR qPCR Mix、Probe qPCR Mix, RT-PCR、PCR、 ...
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StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)
StarLighter 探针法 qPCR 预混液 - 通用型
产品简介
StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 是一款基于探针法可对各种来源的 DNA 样本进行快速定量、实时分析 的通用试剂盒。试剂盒基于性能优异的热启动基因工程改造 Taq DNA polymerase 以及优化的缓冲液,可以有效 降低非特异性扩增,大大增加 qPCR 扩增效率,适用于进行高灵敏的 qPCR 检测。该试剂盒定量范围宽,可以 对靶基因进行准确的定量、定性和 SNP 检测;本产品具有重复性好,可信度高,并兼容各种不同 类型的 qPCR 探针的特点。
产品优势
1. 扩增特异性强,数据结果可靠;
2. 高 GC 模板扩增能力强;
3. 扩增效率高,Ct 值提前;
4. 信噪比高,低 Copy 检测灵敏度高。
产品应用
1. 基因表达分析;
2. SNP 和等位基因分型;
3. 测序和微阵列结果的验证。
产品性能
1、扩增特异性强,数据结果可靠
Fig.1 不 同 试 剂 定 量 结 果 的 准 确 性 比 较。 用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 和其他供应商 试剂,以携带 ApoE3 基因亚型(无 ApoE2 基因亚型) 的人类基因组为模板进行定量(利用 ARMS-qPCR 技术对 ApoE 两个基因亚型 ApoE2、 ApoE3 进行分 型)。启衡星试剂有效扩增携带 ApoE3 基因亚型(高 GC), 供应商 K 未能扩增。 ApoE 基因(扩增片段长 度 197 bp,GC 含量 71%)。
2、 高GC模板扩增能力强
模板量 5 ng | Ct 值 ApoE2 | Ct 值 ApoE3 |
StarLighter probe qPCR mix (Universal) | >45 | 28.08 |
供应商 K | >45 | >45 |
Tab.1 使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 试剂,利用携带 ApoE3 基因亚型的人类基因组为模板进行定量,与供应 商 K 相比,启衡星探针法 qPCR Mix 可以很好检出,供应商 K 未检出。
Fig.2 不同试剂定量高 GC 含量片段的结果比较。以人基因 组为模板,模板浓度分别为 50 ng、5 ng、0.5 ng、0.05 ng, 扩增 ApoE3 基因,扩增片段长度 197 bp, GC 含量 71%。 使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 试剂可得到有效 扩增,而供应商 K 无扩增 (Ct>45)。
3、扩增效率高,线型范围好
StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 与供应商 K 对内参基因 Actin 定量比较,Ct 值比供应商 K 提前且扩增效率好。
Fig.3 不同试剂对连续梯度稀释模板的定量结果比较。以人 基因组为模板,模板浓度分别为 50 ng、5 ng、0.5 ng、0.05 ng,对内参基因 Actin 进行定量,扩增片段长度 179 bp,使 用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 可有效扩增 Actin 基因,扩增效率和 R2 值均优于竞品。Ct 值比供应商 K 提前 约 1-1.5 个 cycle。
4、 灵敏度高、 适用于低拷贝检测
Fig.4 StarLighter Probe qPCR Mix 定量低拷贝样品的结果展示。以人类基因组为模板,模板起始浓度为 100 ng,然后依次 5 倍梯度稀释,使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 试剂进行 qPCR 定量。当模板浓度低至 0.032 ng 时,内参基因 Actin 和目的基因 ApoE3 仍能得到有效扩增,且起始模板量的 log 值和其 Ct 值线性关系良好。
5、 稳定性高
Fig.5 StarLighter Probe qPCR Mix 稳定性测试的结果展示。A 试剂反复冻融至少 30 次;B 试剂 37℃ 放置至 5 天;C 试剂室 温放置至 28 天;D 试剂 4℃放置至 43 天,以人 DNA 为模板,对 Actin 和 ApoE 基因进行定量,未见明显信号强度降低和 Ct 值延迟(本实验在 Thermo Q6 仪器上完成)。
说明书附件下载:
FS-Q2001 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)-说明书.pdf